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更新時間︰2023-07-07點擊次數︰375

操作步驟


1. 標準品的稀釋與加樣︰在黴標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然後在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然後從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻後從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣︰分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及黴標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在黴標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于黴標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育︰用封板膜封板後置37℃溫育30分鐘。

4. 配液︰將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用。

5. 洗滌︰小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加黴︰每孔加入黴標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育︰操作同3。

8. 洗滌︰操作同5。

9. 顯色︰每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止︰每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定︰以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鐘。

柱式植物mtDNAout,測序級(見關聯產品)

柱式植物葉綠體DNAout

細菌DNA提取

Southern級細菌(G+)DNAout(見關聯產品)

Southern級細菌(G-)DNAout(見關聯產品)

百萬堿基級細菌(G+)DNAout(見關聯產品)

百萬堿基級細菌(G-)DNAout(見關聯產品)

大提柱式土壤DNAout

大提柱式細菌DNAout

大提柱式細菌DNAout

土壤DNAout

細菌DNAout(250次)

細菌DNAout(50次)

一步式細菌DNAout

柱式分枝桿菌DNAout

柱式水樣DNAout

柱式土壤DNAout

柱式微生物基因組DNAout

柱式細菌DNAout(50次)

病毒DNA提取

96孔板病毒DNAout(離心法)(1次)

96孔板病毒DNAout(離心法)(5次)

96孔板病毒DNAout(真空法)(見關聯產品)

M13噬菌體單鏈基因組DNAout(見關聯產品)

λ噬菌體DNAout(見關聯產品)




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